前段时间销售部门的同志又追加细菌基因组DNA/RNA提取试剂（磁珠法、预分装）的订单啦！询问客户需求后，实验室小组员们在马不停蹄开发优化验证新产品啦，接下来给大家分享一下实验成果。

一、实验目的

用自动核酸提取纯化仪能够成功提取细菌基因组DNA，并获得较好的电泳条带。

二、实验仪器及试剂

仪器：台式离心机（SIGMA）、超微量分光光度计（Q5000）、电泳仪（北京六一仪器厂，DYY-7C型）、自动核酸提取仪（LJbio32H）

试剂：细菌基因组DNA提取试剂盒（磁珠法、预分装）（货号：200866）

三、实验方法

1、样本处理：取过夜培养的细菌100～1000 μL（细胞数为10⁸-10⁹）至1.5 mL 离心管中10000g离心2min，吸弃上清，再加入200 μL EB重悬菌体备用。

2、按照试剂盒说明书手工操作，提取细菌基因组DNA。

3、优化自动核酸提取纯化仪的上机参数（①65℃裂解，8min ②65℃裂解，10min ③室温裂解，10min）。

4、用超微量分光光度计测量提取的DNA，并进行电泳检测。

四、实验结果

1、在超微量分光光度计上用EB润洗点点空白，取1-2 μl的洗脱产物检测，记录各个波长的吸光度，得到的数据如下：

表1  核酸提取纯化仪提取结果

备注：加底纹的电泳

2、 在1%的琼脂糖凝胶上加入6μL洗脱的基因组DNA/扩增产物/DNA Marker进行电泳，结果如下：

M：DL2000Ladder

1:65℃裂解，8min；2-3: 65℃裂解，10min；4-5: 常温10min

五、分析与讨论

1、由浓度测量结果和产物电泳图可知，三种提取条件下纯度与纯度稍有差异，室温裂解条件下，电泳结果点样孔有滞留，裂解效果比其他两种稍差，但也有明显DNA带与两条RNA条带。

2、电泳图编号4 的DNA条带略暗，与测量结果也能对应起来，分析原因是提取所用耗材此孔位对应的磁棒套稍长一点，仪器提取过程中磁棒套搅拌过程中影响其裂解效果，导致此孔提取核酸测量值与电泳结果稍差。

3、对比三种程序提取效果，65℃裂解8min的测量值较均一，重复性较好，DNA条带最亮。

上海领骏生物科技有限公司成立于2016年，位于上海市青浦区张江云立方园区。公司长期致力于生物领域内相关产品的研发、生产和销售，产品主要包括磁性纳米材料和磁珠法核酸提取纯化试剂。公司一直坚持以“质量、诚信、团结、奋进”为宗旨，严格规范质量管理体系，持续创新、精益求精，为客户提供优质的产品和服务,被认定为国家级高新技术企业和上海市专精特新企业。

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