无内毒素质粒DNA小量提取试剂(磁珠法)
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					 产品编号  | 
				
					 产品名称  | 
				
					 规格型号  | 
			
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					 241001S  | 
				
					 无内毒素质粒DNA小量提取试剂(磁珠法)  | 
				
					 瓶装:50 T/盒、100 T/盒、200 T/盒  | 
			
	
	
	
	
【产品简介】
本产品采用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方只需要几次简单清洗去除内毒素、蛋白质、多糖等杂质,即可获得高质量的质粒DNA。本产品提取纯化质粒DNA对质粒损伤小、提取浓度高、超螺旋比例高。提取的质粒DNA可用于酶切、PCR、测序、连接和转化等应用场景。
【产品优势】
1、核心原料自己生产,产品质量及产量均有保证。
2、可有效去除内毒素,提高转染效率。
3、提取质粒DNA纯度高,OD260/OD280通常在1.7-2.0左右;超螺旋比例高。
4、操作简单,快捷,安全,无需酚/氯仿等有毒有机试剂。
5、可配合全自动核酸提取纯化仪,实现自动化、高通量操作。
【实验案例】
1、案例一:
(1)样本为DH5α大肠杆菌(含PHY300PLK-egls基因质粒,碱基对约6000bp,为低拷贝质粒),菌液OD600=0.11,提取后经Quawell Q5000微量紫外可见光分光光度计测定,结果如下:
		
	
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						 序号  | 
					
						 菌液体积(mL)  | 
					
						 A260/A280  | 
					
						 A260/A230  | 
					
						 Conc.(ng/μL)  | 
					
						 洗脱体积(μL)  | 
					
						 产量(ng)  | 
				
| 
						 1  | 
					
						 5  | 
					
						 1.786  | 
					
						 1.953  | 
					
						 259.65  | 
					
						 100  | 
					
						 25.97  | 
				
| 
						 2  | 
					
						 1.792  | 
					
						 1.975  | 
					
						 265.5  | 
					
						 26.55  | 
				||
| 
						 平均值  | 
					
						 1.789  | 
					
						 1.964  | 
					
						 262.58  | 
					
						 26.26  | 
				
电泳结果如下:
	备注:原样浓度6 μL上样电泳,琼脂糖凝胶浓度为1%,120 V电泳。
(2)结果分析:
Quawell Q5000微量紫外可见光分光光度计测定结果表明:
①A260/A280的值在1.7左右,A260/A230的值在1.9左右,证明提取产物纯度高。
②菌液OD600=0.11条件下,5 mL 的培养菌液的无内毒素质粒提取产量可达到26 ng左右 。
琼脂糖凝胶电泳结果表明:
条带明亮且完整性好。
综上所述,利用无内毒素质粒DNA小量提取试剂提取5 mL菌液样本,提取产物纯度高、产量高、电泳条带完整。
2、案例二:
(1)样本为DH5α大肠杆菌(含PHY300PLK-egls基因质粒,碱基对约6000bp,为低拷贝质粒),菌液OD600=0.239,使用LJbio32H自动核酸提取仪提取质粒(结合步骤开始仪器操作,振幅均为3级,提取后经Quawell Q5000微量紫外可见光分光光度计测定,结果如下:
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						 序号  | 
					
						 样本 (mL)  | 
					
						 A260/A280  | 
					
						 A260/A230  | 
					
						 Conc.(ng/μL)  | 
					
						 洗脱体积(μL)  | 
					
						 产量(mg)  | 
				
| 
						 1  | 
					
						 4 mL  | 
					
						 1.903  | 
					
						 2.39  | 
					
						 1124.3  | 
					
						 100  | 
					
						 0.11243  | 
				
| 
						 2  | 
					
						 1.902  | 
					
						 2.387  | 
					
						 1130.5  | 
					
						 0.11305  | 
				||
| 
						 平均  | 
					
						 1.9025  | 
					
						 2.3885  | 
					
						 1127.4  | 
					
						 0.11274  | 
				
电泳图如下:
		
	
备注:6 μL DNA模板上样电泳,琼脂糖凝胶浓度为1%,120 V电泳。
(2)结果分析:
Quawell Q5000微量紫外可见光分光光度计测定结果表明:
①A260/A280的值在1.9左右,A260/A230的值在2.3左右,证明提取产物纯度高。
②菌液OD600=0.239条件下,4 mL 的培养菌液的无内毒素质粒提取产量可达到0.11 mg 。
琼脂糖凝胶电泳结果表明:
条带明亮且完整性好。
综上所述,利用无内毒素质粒DNA小量提取试剂提取4 mL菌液样本,提取产物纯度高、产量高、电泳条带完整。
【应用领域】
使用本试剂盒提取的质粒DNA可用于各种生物学实验,如酶切、测序、文库筛选,连接和转化等。
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